Esta semana procedimos con la actividad que la semana pasada no habiamos podido realizar, es decir, la extraccion de ADN de bacterias E.Coli procedentes de una cepa no patogena.
Cada uno de nosotros recibio un pellet de bancterias E.Coli, conseguido a traves de la centrifugacion de dos alicuotas distintas de un caldo sembrado con las mismas bacterias.
A partir de eso, cada uno procedio con su pellet para poder extraer el ADN por separado, no a modo de competencia, pero para realizar los mismos pasos cada uno y poder comparar resultados.
Tambien, previo a empezar la extraccion, nos ocupamos de revelar una membrana de nitro celulosa a la que habian sido transferidas proteinas de otra corrida realizada hacia algun tiempo en la que no habiamos participado mas alla de la preparacion del gel de poliacrilamida.
Para el final de la practica, ambos dos contabamos con una varilla en la que habiamos enroscado el ADN obtenido, ya que tiene una consistencia similar a la de una mucosa.
Por ultimo, queremos mencionar que la proxima semana no habra practica debido a que ambos, Alicia y Mauricio, se tomaran la semana por vacaciones de la facultad. Sumadas nuestras vacaciones de invierno, tendremos un periodo de tres semanas de inactividad.
Martin Sapir y Gabriel Colodenco
Esta semana nos ibamos a dedicar a extraer adn de bacterias E.coli, pero como no teniamos los cultivos decidimos cambiar de practica y realizar una PCR.
Trabajamos con 4 secciones de ADNc y los preparamos para realizar la PCR, una de ellas siendo un negativo para comprobar contaminaciones y terminamos la experimentacion del dia al ponerlas en la maquina PCR nueva del laboratorio.
Martin Sapir y Gabriel Colodenco
Esta semana trabajamos con plasmidos y nos dedicamos a purificarlos mediante un proceso de varias soluciones y centrifugaciones.
Una vez los terminamos de purificar, realizamos una corrida en gel de agarosa (southern blot) para comprobar la purificacion.
Una vez terminamos la corrida, pudimos ver una sola banda brillante a la luz ultravioleta en el gel, ya que le habiamos aplicado bromuro de etidio para este proposito.
Esta unica banda por calle demuestra que la purificacion de los plasmidos fue efectiva.
Esta es la lampara UV que usamos para ver las bandas del gel
Las bandas brillantes son los plasmidos que brillanpor el bromuro de etidio; la corrida salio prolija y sin contaminaciones
