Estas eran algunas de las ratas usadasen la investigacion de la pasantia de nuestras compañeras
Estas eran algunas de las ratas usadasEsta semana trabajamos con muestras de placentas preeclampticas y las preparamos para las centrifugaciones necesarias para extraer las vesiculas de las membranas celulares de las mismas.
Primero las rotulamos y separamos en tubos, una vez hecho esto las procesamos con el ultraturrax para romper todas las membranas posibles. Por ultimo empezamos con las centrifugaciones diferenciales que resultarian en la extraccion de las vesiculas, pero no realizamos todas porque las ultimas requieren de varias horas.
Martin Sapir Y Gabriel Colodenco
Esta semana trabajamos extrayendo cARN de dos cultivos de E.Coli. Cada uno de nosotros trabajo con uno y una vez que terminamos la extraccion lo llevamos a PCR para amplificar lo que logramos extraer. Tuvimos que trabajar con mucho cuidado ya que todo debia estar libre de rnasas que pudieran hacer fracasar la extraccion
Martin Sapir y Gabriel Colodenco
La preeclampsia, es una complicación médica del embarazo también llamada toxemia del embarazo o hipertensión inducida embarazo y asociada a elevados niveles de proteína en la orina. Debido a que la preeclampsia se refiere a un cuadro clínico o conjunto sintomático, en vez de un factor causal específico, se ha establecido que puede haber varias etiologías para el trastorno. Es posible de que exista un componente en la placenta que cause disfunción endotelial en los vasos sanguíneos maternos en mujeres susceptibles. Aunque el signo más notorio de la enfermedad es una elevada presión arterial, puede desembocar en una eclampsia, con daño al endotelio materno, riñones e hígado. La única cura es la inducción del parto, una cesárea o aborto y puede aparecer hasta seis semanas posparto. Es la complicación del embarazo más común y peligrosa, por lo que debe diagnosticarse y tratarse rápidamente, ya que en casos severos ponen en peligro la vida del feto y de la madre.
El descubrimiento de la preeclampsia se remota a hace mas de 100 años, pero aun no se ha logrado descubrir una causa puntual ni, por ende, una manera de diagnosticarla con precisión mas allá del reconocimiento de los síntomas asociados a la misma pasada la 24º semana de gestación. Dichos síntomas son:
-Hipertensión
-Proteinuria
-Edemas
Siendo la hipertensión el mas característico de dichos síntomas.
En teoría, solo se podría, en rigor, diagnosticar una preeclampsia si se observan 1) Reducción del flujo renal y uterino; 2) Reducción del filtrado glomerular; 3) Aumento de presión arterial con prueba de infusión de angiotensina; 4) Disminución de la excreción de sodio en prueba de sobrecarga; 5) Lesión glomerular típica por biopsia renal.
Aun así, el diagnostico clínico de la preeclampsia puede ser erróneo y comprender verdaderas nefropatias no reconocidas, hipertensión arterial no diagnosticada, hipertensión esencial exteriorizada durante la gestación con niveles normales en la primera mitad. Muy frecuentemente, la triada sintomática es inadvertida o despreciada por la paciente. Mas adelante, cuando se desarrollan síntomas mas alarmantes o que ellas mismas pueden detectar (cefaleas, trastornos visuales, edema palpebral y digital, etc.) el proceso suele estar avanzado y se ha perdido mucho tiempo. Por consiguiente, es obvia la importancia trascendental del control prenatal en la detección y tratamiento temprano de la patología, especialmente si se detectan factores predisponentes, ya que las formas severas son prevenibles.
Sin embargo, la posibilidad del diagnostico mediante el seguimiento del proceso de gestación no es suficiente en la lucha contra la enfermedad, ya que una falta de controles representa casi lo mismo que una ceguera a la hora del diagnosis, eso sin mencionar los sectores de bajos recursos o los sectores alejados de hospitales.
Como patología mas recurrente entre las asociadas al embarazo (afectando entre el 5% y el 10% de las mujeres que transcurren esta etapa) es indispensable el descubrimiento de una causa puntual que lleve a un diagnostico mas simple, preciso y accesible, por eso es que nos dedicamos al estudio de la AQP9, que es una proteína importante en el funcionamiento de las células y en un cuadro preeclamptico parece tener un comportamiento fuera de lo común.
Esta semana procedimos con la actividad que la semana pasada no habiamos podido realizar, es decir, la extraccion de ADN de bacterias E.Coli procedentes de una cepa no patogena.
Cada uno de nosotros recibio un pellet de bancterias E.Coli, conseguido a traves de la centrifugacion de dos alicuotas distintas de un caldo sembrado con las mismas bacterias.
A partir de eso, cada uno procedio con su pellet para poder extraer el ADN por separado, no a modo de competencia, pero para realizar los mismos pasos cada uno y poder comparar resultados.
Tambien, previo a empezar la extraccion, nos ocupamos de revelar una membrana de nitro celulosa a la que habian sido transferidas proteinas de otra corrida realizada hacia algun tiempo en la que no habiamos participado mas alla de la preparacion del gel de poliacrilamida.
Para el final de la practica, ambos dos contabamos con una varilla en la que habiamos enroscado el ADN obtenido, ya que tiene una consistencia similar a la de una mucosa.
Por ultimo, queremos mencionar que la proxima semana no habra practica debido a que ambos, Alicia y Mauricio, se tomaran la semana por vacaciones de la facultad. Sumadas nuestras vacaciones de invierno, tendremos un periodo de tres semanas de inactividad.
Martin Sapir y Gabriel Colodenco
Esta semana nos ibamos a dedicar a extraer adn de bacterias E.coli, pero como no teniamos los cultivos decidimos cambiar de practica y realizar una PCR.
Trabajamos con 4 secciones de ADNc y los preparamos para realizar la PCR, una de ellas siendo un negativo para comprobar contaminaciones y terminamos la experimentacion del dia al ponerlas en la maquina PCR nueva del laboratorio.
Martin Sapir y Gabriel Colodenco
Esta semana trabajamos con plasmidos y nos dedicamos a purificarlos mediante un proceso de varias soluciones y centrifugaciones.
Una vez los terminamos de purificar, realizamos una corrida en gel de agarosa (southern blot) para comprobar la purificacion.
Una vez terminamos la corrida, pudimos ver una sola banda brillante a la luz ultravioleta en el gel, ya que le habiamos aplicado bromuro de etidio para este proposito.
Esta unica banda por calle demuestra que la purificacion de los plasmidos fue efectiva.
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