Esta semana realizamos un tercer western blot, ya que los dos anteriores no tenian revelados muy claros. Por los resultados obtenidos, estaba claro que el primero habia fallado por la fuente usada, pero el segundo habia salido mal de un lado y bien del otro, por lo que concluimos que era una cuestion de la temperatura. Al parecer la fuente levantaba temperatura durante la transferencia a la membrana de nitrocelulosa y esta no se daba bien, y como poniamos hielo para mantener la temperatura, pero solo de un lado, una salio bien y la otra no. Esta vez aplicamos mucho hielo y en todos los lados de la cuba para que se realize bien la transferencia a la membrana de nitrocelulosa.
Ademas, teñimos uno de los geles con coomasie blue para poder ver todas las proteinas y tener asi un negativo, ya que el revelado de la membrana es con anticuerpos y por lo tanto es especifico.
El gel con las proteinas ya corridasmientras se tiñe con el coomasie blue
Instrucciones para purificar ARN,una de las proximas tareas que realizaremos
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